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CRISPR是继RNA干扰技术、高通量测序技术等之后生物科学发展历史上最具颠覆性技术之一,使用高效、迅速且简单,在生物医学研究领域引起一场巨变,并因此成为生物医学实验室常规技术。随着CRISPR基因治疗临床实验的初步成功,以及2018年的基因编辑婴儿事件预热,CRISPR技术被越来越多的研究人员用来改造人类基因以消除疾病,创造生命力更加顽强的植物,消灭病原体等。在过去的7年中CRISPR技术斩获了生命科学领域各种重量级奖项,包括生命科学突破奖,盖尔德纳国际奖等,《Science》年度突破、《Nature》年度人物均授予了CRISPR单碱基基因编辑技术的突破,2019年9月,北京大学邓宏魁组完成世界首例基因编辑治疗艾滋病和白血病,使CRISPR技术再一次成为生命科学的焦点。
随着近几年的发展,研究者开发出越来越多基于CRISPR的新型基因编辑技术,例如CRISPR转录激活/抑制技术,基因定位,表观遗传修饰,单碱基基因编辑系统(BE2,BE3,ABE等),CRISPR基因突变检测系统(Sherlock、DETECTR),无修复模板基因敲入技术等。CRISPR/Cas9系统的应用更加便捷、高效,也更广泛,目前该技术成功应用于人类细胞、斑马鱼、小鼠以及细菌等基因组精确修饰,成为科研人员的强大工具,基于CRISPR临床实验已经取得初步成功。
为了让更多的科研人员及时全面的掌握CRISPR最新技术,并应用的相应的领域研究中。特于2019年12月21日至22日在北京理工大学国际教育交流中心举办CRISPR/Cas9基因靶向修饰技术培训班。在带教教师的指导下,学员独立完成一系列全部实验,免费获得三份CRISPR/Cas9敲除质粒载体(可以用于哺乳动物、植物、真菌、细菌、斑马鱼、线虫等,共60种)。免费赠送sgRNA离线设计软件(有基因组DNA序列即可设计!)
课程安排:
日期
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时间
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培训内容
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授课老师
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12月
20日
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10:00-18:00
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培训报到
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刘刚博士
2008年博士毕业于中国科学院上海生命科学研究院,从事肿瘤干细胞,细胞衰老,肿瘤转移等细胞作用网络和通路的研究,并作为骨干研究人员参加了973计划项目、国家自然科学基金重点项目、在香港中文大学做为作为Postdoc和Research fellow,从事研究工作。先后Nature Genetics,cell research、PLOS one等期刊发表论文十余篇。
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12月
21日
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9:00-11:30
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理论讲解:
一、基因编辑技术简介(三代基因编辑工具)
1. ZFN 2.TALEN 3.CRISPR
二、CRISPR/Cas9基因编辑技术原理
1. CRISPR/Cas9发现历史
2. CRISPR/Cas9作用机制解析
3. CRISPR/Cas9系统改造策略
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13:00-17:00
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理论讲解:
一、sgRNA在线设计构建实战演练(1.靶基因序列查找2.sgRNA在线设计合成)
二、CRISPR/Cas9转染策略:
1.生物转染(慢病毒、腺相关病毒等)
2.物理转染 (电转核酸/RNP、显微注射、基因枪)
3.化学转染 (脂质体、阳离子聚合物)
三、CRISPR/Cas9 sgRNA效率检测,脱靶检测及解决策略
1、高保真Cas9(espCas9、Hifi-Cas9、Cluster1-Cas9)
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12月
22日
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9:00-11:30
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理论讲解:
一、CRISPR技术应用解析
1.基因敲除(单基因敲除、多基因敲除、大片段删除、多靶点sgRNA载体构建策略)
2.基因敲入实战演练(gRNA选择、同源臂设计、导入,长片段导入策略/提高基因敲入效率策略,PITCh、HITI、CRISPR-转座酶高效基因敲入系统)
3.CRISPR在转录调控中的应用(转录激活、转录抑制系统)
4.CRISPR靶基因标记定位
二、CRISPR案例解析
1.基因敲除在小鼠模型构建、植物、细胞、细菌、真菌等中的应用案例解析
2.基于CRISPR的全基因组基因敲除高通量筛选策略(文库构建,选择,流程优化等)
3.基于CRISPR的全基因组转录激活/抑制高通量筛选策略(文库构建,选择,流程优化等)
三、CRISPR/Cas9与基因沉默技术(siRNA、shRNA)系统比较。
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13:00-17:00
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理论讲解:
一、单碱基基因编辑技术简介及在基因治疗中的应用
1.HF2-BE2 2.BE3系统 3.ABE系统4.单碱基基因编辑脱靶克服。
二、基因CRISPR的基因检测系统
1、CRISPR-Cas12a系统介绍(DETECTR)
2、CRISPR-Cas13a系统介绍(SHERLOCK-多重病原菌检测)
三、CRISPR/Cas9系统在肿瘤和遗传病治疗中应用解析
1、CRISPR结合免疫检查点抑制剂治疗肿瘤
2、单基因遗传病治疗(DMD、先天性黑朦、地中海贫血等)
3、CRISPR治疗HIV-基因编辑婴儿解析
4、CRISPR治疗HIV炎性白血病病例解析
四、新一代无模板基因敲入系统解析
- 1、CRISPR Primer-editing 基因敲入原理及应用
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日期
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时间
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培训内容
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12月
22日
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18:00
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实验操作:CRISPR/Cas9敲除质粒转染靶细胞
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12月
23日
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9:00-11:30
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实验操作:一、CRISPR/Cas9基因表达载体克隆构建1.sgRNA设计合成
2.敲除载体选择及线性化
3.sgRNA连接,转化等
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13:00-17:00
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实验操作:
1.CRISPR/Cas9转染后靶DNA检测
2.靶基因修饰位点扩增及鉴定
3. CRISPR基因敲除效果检测
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举办地点:
北京理工大学国际教育交流中心(海淀区北三环西路66号)
参加对象
从事医学、生命科学、农学等领域科研工作者和高校教师及研究生。
授课方式
1.理论讲授。
2.每位学员在辅导教师的指导下,独立完成实验操作。(可选)
收费标准
注册费:3200元/人,2019年12月13号之前汇款报名可以优惠至:3000元/人。实验操作课程需加500元/人。同一个单位三个人以上报名可以免费构建价值1500元的质粒一个;包括学费、资料费、试剂耗材费、其他材料费;免费提供工作午餐,可协助安排住宿,住宿费用自理。
推荐酒店地点:
北京理工大学国际教育交流中心360元/标间。
银行汇款
北京微旋基因技术有限公司
开户行: 中国建设银行北京宣武支行
账 号:11001019500053058529
备 注:银行转账的学员,请于汇款单备注栏内注明参会人姓名
联系人
郑老师 010- 53516075 sales@micro-helix.com
承办单位:
附件:
会议时间 | 2019-12-21至2019-12-22 |
会议地点 | 北京海淀区 |
声明:
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